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一、將包被抗原用包被緩沖液配制包被液，每孔取100 mL加入酶標(biāo)板，蓋好蓋板膜，包被條件如下表，4℃ 16-20h包被時酶標(biāo)板可以疊放，而37℃ 2h包被時酶標(biāo)板之間的間距應(yīng)保持一致（一般為5cm）。根據(jù)培養(yǎng)箱的設(shè)計調(diào)節(jié)酶標(biāo)板間的間距，如培養(yǎng)箱從底部產(chǎn)熱，則應(yīng)增加下層酶標(biāo)板間的間距為10cm 。
二、包被加樣采取吸二打一的方式，應(yīng)避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根據(jù)該滴溶液是否應(yīng)加入孔內(nèi)再做判斷，若應(yīng)加入，則小心振蕩使其落入孔底，反之則用吸水紙小心吸出，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。
三、ELISA試劑盒包被前預(yù)吸查看槍頭是否合格，水流是否一致，不一致者應(yīng)更換槍頭，包被應(yīng)采用槍頭，每包被一塊板，應(yīng)將槍頭套緊，并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致，在包被過程中若出現(xiàn)任何小問題，都應(yīng)將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時淘汰。若采用37℃ 2h包被模式，則應(yīng)給酶標(biāo)板編碼，保證每塊板子的包被時間一致。
四、洗板
五、包被后要進行兩次洗滌，250微升/孔，洗滌完畢后，應(yīng)在毛巾上拍干參與液體，并及時進行下一步封閉。
六、洗滌時要注意查看水流是否一致，在洗滌程中若出現(xiàn)任何小問題，都應(yīng)將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時淘汰。
七、封閉液應(yīng)提前一小時取出初步回溫，用前搖勻，每孔取180 mL加入酶標(biāo)板，蓋好蓋板膜，37℃封閉 1.5h, 酶標(biāo)板之間的間距應(yīng)保持一致（一般為5cm）。根據(jù)培養(yǎng)箱的設(shè)計調(diào)節(jié)酶標(biāo)板間的間距，如培養(yǎng)箱從底部產(chǎn)熱，則應(yīng)增加下層酶標(biāo)板間的間距為10cm 。
八、封閉加樣采取吸一打一的方式，應(yīng)避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根據(jù)該滴溶液是否應(yīng)加入孔內(nèi)再做判斷，若應(yīng)加入，則小心振蕩使其落入孔底，反之則用吸水紙小心吸出，殘留在槍頭內(nèi)的溶液不要打出 以免產(chǎn)生氣泡。并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡
九、封閉前預(yù)吸查看槍頭是否合格，水流是否一致，不一致者應(yīng)更換槍頭，封閉應(yīng)采用槍頭，每封閉一塊板，應(yīng)將槍頭套緊，并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致，在封閉過程中若出現(xiàn)任何小問題，都應(yīng)將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時淘汰。
十、ELISA試劑盒封閉完后，摔倒孔內(nèi)液體，并在毛巾上拍干，接下來采取烘干或者晾干的方式*干燥酶標(biāo)板。烘干：37 ℃倒置（不加蓋板膜或用自封袋），每5塊板烘干30 min，隨著板子數(shù)量增多時間相應(yīng)延長，如100塊板，需要烘3 h，依次類推；晾干：底部鋪一層干凈的A4紙或者吸水紙，倒置板子，在頂層鋪一層蓋住避光，室溫晾18-24h。